HPLC色譜柱,即高效液相色譜柱,是高效液相色譜儀中的關(guān)鍵部件,主要由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,也可采用厚壁玻璃或石英管,要求管內(nèi)壁有很高的光潔度。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板,篩板材料為燒結(jié)不銹鋼或鈦合金,孔徑取決于填料粒度,目的是防止填料漏出。
HPLC色譜柱的主要性能指標(biāo)介紹:
柱效:衡量色譜柱性能的重要指標(biāo),反映了色譜柱的分離能力。柱效越高,色譜柱的分離效果越好。柱效與固定相的粒徑、柱長(zhǎng)、柱徑等因素有關(guān)。
柱壓:色譜柱在運(yùn)行過(guò)程中產(chǎn)生的壓力,與柱內(nèi)流動(dòng)相的流速、固定相的粒徑、柱長(zhǎng)等因素有關(guān)。柱壓越高,色譜柱的運(yùn)行成本和設(shè)備要求越高。
選擇性:色譜柱對(duì)不同樣品的分離能力,與固定相的化學(xué)性質(zhì)、樣品的性質(zhì)等因素有關(guān)。選擇性越高,色譜柱對(duì)復(fù)雜樣品的分離效果越好。
穩(wěn)定性:色譜柱在長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)行過(guò)程中保持性能不變的能力,與固定相的化學(xué)穩(wěn)定性、柱的制備工藝等因素有關(guān)。穩(wěn)定性越高,色譜柱的使用壽命越長(zhǎng)。
重現(xiàn)性:色譜柱在多次運(yùn)行過(guò)程中保持分離效果一致的能力,與固定相的均勻性、柱的制備工藝等因素有關(guān)。重現(xiàn)性越高,色譜柱的分析結(jié)果越可靠。
在選擇HPLC色譜柱時(shí),需要考慮分離模式、柱長(zhǎng)、填料的大小和類型以及色譜填料的材料等因素。不同的分離模式適用于不同的樣品類型和分析需求;柱長(zhǎng)的選擇取決于樣品的復(fù)雜程度和分離要求;填料的大小和類型決定了色譜柱的分離效率和背壓;色譜填料的材料則決定了色譜柱的選擇性和穩(wěn)定性。